Author:
Pál Kaposi-Novák Klinikai Orvostudományok Doktori Iskola, Semmelweis Egyetem, Budapest
II. sz. Patológiai Intézet, Semmelweis, Egyetem, 1091, Budapest, Üllői út 93.

Search for other papers by Pál Kaposi-Novák in
Current site
Google Scholar
PubMed
Close
Restricted access

Absztrakt

A génexpresszió microarray-alapú globális elemzése sikeresen alkalmazható a humán tumorok, közöttük a primer májrákok karakterizálására. A microarray technológia elősegítheti a rákbetegek korai diagnózisát, prognosztikus és terápiás klasszifikációját. Annak érdekében, hogy az archivált patológiai mintákban elrejtett genomikai információhoz jobb hozzáférést biztosítsunk, három különböző fixálószerrel kezelt, paraffinba ágyazott szöveteken vizsgáltuk az RT-PCR reakciók hatékonyságát. Minden fixálószer estén megbízható amplifikációt kaptunk, amennyiben az amplikon mérete nem haladta meg a 225 bp-t. A termékhossz további növekedésével azonban a reakció hatékonysága és reprodukálhatósága gyorsan csökkent. A legjobb szöveti morfológiát és a legegyenletesebb claudin-4 és claudin-7 immunhisztokémiai festést ugyanakkor a formalin-fixált minták estén láttuk. A konvencionális lineáris RNS-amplifikációs protokollt egy random nonamer T3-polimeráz lépéssel módosítottuk. A T7T3 amplifikáció olyan “sense” szálú terméket hozott létre, ami indirekt jelölt cDNS-templáttá volt konvertálható. A fagyasztott és mikrodisszektált Myc és Myc/TGF-α egértumorok microarray-elemzése az amplifikációt követően jól reprodukálható expressziós profilokat (r=0,9) eredményezett, az eredeti expessziós mintázatok megtartottak voltak (r=0,78). A HGF-kezelt, c-Met kondiconális knock-out és kontroll egerekből származó májsejtek expressziós profiljainak összehasonlításával 690, a HGF/c-Met útvonal által szabályozott gént azonosítottunk. A szignifikáns gének funkcionális elemzése azt mutatta, hogy a c-Met receptor a májsejtek motilitásának és oxidatív homeosztázisának fontos regulátora. A c-Met-indukált expressziós mintázat kifejeződését humán HCC-kben is vizsgáltuk, és beazonosítottuk a humán tumorok egy csoportját (27%), melyekben a c-Met útvonal aktivációja valószínűsíthető (MET+). E tumorokra a gyakori vaszkuláris invázió, a magas mikrovaszkuláris sűrűség és a többihez képest rövidebb túlélés volt jellemző. Egy, a 111 evolucionálisan konzervált c-Met-célgén expresszióján alapuló predikciós modell pedig 83–95%-os pontossággal volt képes a májkarcinómás betegeket a jó és a rossz túlélést mutató csoportokba szétválogatni. Összességében kutatásaink megmutatták, hogy a gondos kísérlettervezés és a legkorszerűbb molekuláris metodikák felhasználása mellett archivált és ezáltal ritka mintákon is lehetővé válik a globális génexpresszió elemzése. A komparatív genomikai analízis segítségével pedig olyan új molekuláris klasszifikációs rendszereket hozhatunk létre, amelyek nélkülözhetetlenek az individualizált daganatterápiás protokollok létrehozásához.

  • 1. P Kaposi-Novak JS Lee L Gomez-Quiroz et al.2006 Met-regulated expression signature defines a subset of human hepatocellular carcinomas with poor prognosis and aggressive phenotype J Clin Invest 116 1582 1595.

    • Search Google Scholar
    • Export Citation
  • 2. Kaposi-Novak P , Lee JS, Mikaelyan A, et al. Oligonucleotide microarray analysis of aminoallyl-labeled cDNA targets from linear RNA amplification. Biotechniques 37: 580, 582–586, 588, 2004.

    • Search Google Scholar
    • Export Citation
  • 3. C Paska K Bogi L Szilak P Kaposi-Novak et al.2004 Effect of formalin, acetone, and RNAlater fixatives on tissue preservation and different size amplicons by real-time PCR from paraffin-embedded tissue Diagn Mol Pathol 13 234 240.

    • Search Google Scholar
    • Export Citation
  • 4. G Lotz A Kiss P Kaposi-Novak et al.2001 Hepatitis viruses and hepatocarcinogenesis J Physiol Paris 95 417 422.

  • 5. E Szabo C Paska P Kaposi-Novak et al.2004 Similarities and differences in hepatitis B and C virus induced hepatocarcinogenesis Pathol Oncol Res 10 5 11.

    • Search Google Scholar
    • Export Citation
  • 6. A Kiss G Lotz P Kaposi-Novak Z Schaff 2002 Hepatitis viruses and hepatocarcinogenesis Orvosi Hetilap 143 83 86.

  • 7. T Glasz E Hortovanyi G Mozes et al.2004 Chlamydia pneumoniae in coronary bypass grafts of redo patients. The concept of the ‘adventitial baseline infection’ Pathol Res Pract 200 609 618.

    • Search Google Scholar
    • Export Citation
  • 8. B Podanyi A Kiss P Kaposi-Novak et al.2005 Hepatitis C virus RNA in the cutaneous eruption but not in the symptom-free skin from patient with prurigo simplex and chronic C hepatitis J Eur Acad Dermatol Venereol 19 520 522.

    • Search Google Scholar
    • Export Citation
  • 9. B Podanyi A Kiss P Kaposi-Novak et al.2004 Hepatitis C virus RNA in the skin eruption from patients with prurigo and chronic hepatitis C Orvosi Hetilap 145 2371 2374.

    • Search Google Scholar
    • Export Citation
  • 10. AM Tokes J Kulka S Paku et al.2005 Claudin-1, -3 and -4 proteins and mRNA expression in benign and malignant breast lesions: a research study Breast Cancer Res 7 R296 R305.

    • Search Google Scholar
    • Export Citation
  • 11. J Kulka AM Tokes P Kaposi-Novak et al.2006 Detection of HER-2/neu gene amplification in breast carcinomas using quantitative real-time PCR – a comparison with immunohistochemical and FISH results Pathol Oncol Res 12 197 204.

    • Search Google Scholar
    • Export Citation
  • Collapse
  • Expand

Magyar Onkológia
Language Hungarian
Size  
Year of
Foundation
1956
Publication
Programme
 
Volumes
per Year
 
Issues
per Year
 
Founder Magyar Onkológusok Társasága
Founder's
Address
H-1122 Budapest, Hungary Ráth György u. 7-9.
Publisher Akadémiai Kiadó
Publisher's
Address
H-1117 Budapest, Hungary 1516 Budapest, PO Box 245.
Responsible
Publisher
Chief Executive Officer, Akadémiai Kiadó
ISSN 0025-0244 (Print)
ISSN 2060-0399 (Online)

Monthly Content Usage

Abstract Views Full Text Views PDF Downloads
Sep 2023 8 0 0
Oct 2023 10 0 0
Nov 2023 8 3 0
Dec 2023 38 4 1
Jan 2024 30 0 0
Feb 2024 27 0 0
Mar 2024 0 0 0